啤酒酵母扩大培养在某种意义上说是生产酵母，是指从斜面种子到生产所用的种子的培养过程，及时向生产中提供足够量的优良、强壮的酵母菌种，以保证正常生产的进行和获得良好的啤酒质量。一般把酵母扩大培养过程分为二个阶段：实验室扩大培养阶段和生产现场扩大培养阶段。
根据菌种保藏原理，选择科学的方法，正确保藏酵母菌种。菌种保藏主要是根据微生物生理、生化特点，使微生物的代谢处于不活泼、生长繁殖受抑制的休眠状态。就是利用低温、干燥、缺氧的条件下，使菌种在长时间内保持原有的生产状态和生命活力。留种酵母需经活化技术处理、复壮后再进行扩大培养。采取科学的扩培方法，掌握恰当的扩大倍数和移种时间。实验证明，在酵母生长高峰期，即15小时前必须充分供氧，15小时后只能少量通风起搅拌作用。保持接种酵母旺盛的发酵力是保证啤酒稳定的前提。应选择对酒精的依赖性和对渗透压的承受力强的酵母。应选择高活性的酵母类型，酵母死亡率低，酵母自溶也就少。应采取恰当的酵母菌种，定期扩培，提供健壮、发酵旺盛的酵母供大生产需要，及时淘汰高代劣质酵母。
一．啤酒酵母扩大培养过程⑴实验室扩大培养阶段（示例）
斜面试管（原始保存菌种）→斜面活化→10ml液体试管→100ml培养瓶→1L培养瓶⑵生产现场扩大培养阶段100L种子罐→600L扩培罐→3000L培养罐→10kL培养罐→30kL培养罐→125kL培养罐→0代酵母
二．酵母扩培要求
（1）人员要求：各级扩培人员要具备高度的无菌意识，实验室阶段，要严格按照无菌操作规程进行；生产现场扩培人员要换好指定上岗工作服，扩培操作前要用75%酒精擦拭双手，避免交叉污染的发生。
（2）环境要求：对无种室要按要求定期灭菌，要求紫外线照射最低30min，实验仪器随时按需0.1MPa，20～30min高压灭菌；凡是接种、麦汁追加过程所要经过的管路、阀门必须用热水或蒸汽彻底灭菌，室内的地面、墙壁也要用一定浓度的消毒剂定期喷洒消毒灭菌，室内空气在接种前一天进行彻底灭菌，同时在接种前还要进行二次灭菌。
（3）扩培麦汁要求：种子罐之前的麦汁尽量取头号麦汁，加水调节浓度为11～120P，灭菌要求0.1MPa，20～30min;也可经过特殊处理后，进行干热灭菌，要求120℃恒温3h;现场扩培用麦汁为沉淀槽中的热麦汁，浓度在120P左右，α－氨基氮应在180～220mg/L，可添加适量的酵母营养盐。麦汁灭菌方法同前。
（4）压缩空气要求：通风供氧用的压缩空气必须经过三级膜过滤之后才能使用。同时充氧量要适量，充氧不足酵母生长缓慢，充氧过度会造成酵母细胞呼吸酶活性太强，酵母繁殖量过大对后期发酵不利。一般扩培酵母在进入培养罐前每天要通氧三次，每次20-30分钟。
（5）菌种要求：a.原菌种的性状要优良；b.扩培出来的酵母要强壮无污染。
三、酵母扩大培养过程中的检查
（1）灭菌效果检查：扩大培养用的一切设备、用具，在按既定的操作清洗灭菌后，也要不定期地检查操作是否符合要求。无菌室要定期进行室内空气清洁度的检查；培养基使用前进行无菌培养检查；各培养罐及管路清洗后的残水检查；无菌空气和水源的检查等，其中种子罐和扩培罐的通风截门是容易引起污染的地方，应作为检查重点。
（2）培养液的检查：每次酵母培养液在扩大操作前后，都要留样作多项检查，以了解扩大操作是否适时，是否有污染等，可指导下次扩大操作或见异常及时终止扩大培养。
a．酵母出芽率和悬浮酵母细胞数的检查。取酵母培养液直接镜检，用血球计数法进行酵母细胞数的测定。悬浮酵母数必须在5×107个∕ml以上，实践中有的发酵旺盛时，有的菌种悬浮酵母细胞数可达1亿以上个∕ml。酵母芽生率一般在20-30%较好，出芽率过高，说明酵母正处在旺盛的对数生长期，一般酵母细胞总数较低；出芽率太低，酵母生长繁殖可能已进入减速生长期，容易使酵母衰老。
测定细胞数时，要注意取样的均匀性，要取具有代表性的样品。
b.外观糖度的检查，直接用糖度表20℃及时测量即可。
d.培养液无菌检查。根据微生物检测标准，取培养液进行检测，及时关注无菌程度。
（3）发酵过程的检查：发酵过程中，每天检测悬浮酵母数，画出酵母数变化曲线。高泡期酵母数在5-8×107个∕ml以上，而随着温度较低，悬浮酵母数逐渐减少，可降至1×107个个∕ml以下，这样回收酵母一定不会少。如果酵母数降不下来，应延长时间，降低温度。
（4）回收酵母的检查：
a.外观检查：从发酵液中回收酵母泥时，应观其颜色洁白，无异味，自感不粘。泵送酵母时，观察酵母乳液应呈均匀乳状。
b.酵母收量：一般来说，酵母回收比例在1:2-4，一次回收量最低够下次两倍体积麦芽汁的添加，例如酵母添加量为0.5%（V/V），回收量为1.5%-2%，经洗涤后，仍可添加两倍以上麦芽汁的用量。另外，还要看酵母泥结块沉淀稀稠程度。酵母经过多次回收后，会出现以下两种情况，一种是随着使用代数的增加，沉淀情况不变，发酵降糖越来越差；另一种是降糖越来越快，沉淀变差，回收酵母体积大，会加大损失。这两种情况都是酵母衰老的表现，应该立即淘汰。
c.显微镜检查：回收的酵母在显微镜下，呈圆形或卵圆形（椭圆形），与原来的菌种形态一致，如果出现拉长，小细胞是非正常现象。另外注意细胞质内容物，细胞壁状态等，以判定酵母是否处在生长旺盛的强壮时期。